Biyolojik İndikatör (SCBI)

SGM  BIOTECH

BİYOLOJİK GÖSTERGE UZMANLARI

Cilt 6, Sayı 6

Kasım 2009-12-01

Kurt McCauley Araştırma & Geliştirme Laboratuar Müdürü

Sınırların Tanımlanması: Kendi Kendine Yeten Bir Biyolojik indikatörler(SCBI) Güzelliği

 Bir sterilizasyon döngüsünün amacı yükü, genellikle canlı organizma yükü olarak tarif edilen yaşayan kirletici mikroorganizmalardan arındırmaktır. Bu tür mikro organizmalarla çalışmanın zorluklarından biri ne zaman yaşayan (canlı) ya da ölü durumda olduklarını tanımlamakta ortaya çıkmaktadır. Sterillik testinde, büyüme kanıtı gösteren bir numune pozitif sonuç bildirmek için yeterli ve böylece testi sonuçlandırır mahiyettedir ( ve çoğu zaman başka testlerin yapılmasını tetikler). Ancak, büyümeye dair herhangi bir kanıt yoksa, tüm mikroorganizmaların ölü olduğunu ve yükün steril olduğunu bildirmek ne zaman doğru ve güvenli olur?

Çoğu durumda, mikro organizmalar genellikle, kabul edilen bir kültür ortamına yerleştirildiklerinde (çoğu bilinen organizmaların büyüme gerçekleştirmesi beklenir) ve belirli bir zaman süresinde istenilen sıcaklıkta inkübe edildiklerinde büyüme gösterememeleri halinde ölü olarak tanınır. Bununla birlikte, bir dizi kültür koşulları altında oluşan bir negatif sonuç pozitif bir sonucun farklı bir kültür ortamına sahip olmasına ya da daha uzun bir inkübasyon süresinin kullanılmasına yol açmış olabilir.

 Organizmaların sayısı ve türleri dahil, biyo organizma yükünün doğasını anlamak önemlidir. Canlı organizma yükü sterilizasyon sürecine spor olmayan oluşturuculardan genellikle daha çok dirençli olan spor oluşturucular dahil çeşitli canlılardan oluşabilir. Ancak, bizim yaptığımız deneyde, bu spor oluşturan canlılar bile, yaygın olarak bilinen ve biyolojik göstergelerde kullanılan test canlılarından önemli ölçüde daha az dirençlidir.

 Biyolojik İndikatör(BI)

 Sıcaklık sensörünün özel bir amaca yarayan bir alet olması gibi, biyolojik göstergeler de özel bir amaca yarayan aletlerdir. Tüm araçlar daha iyi anlaşıldığında daha değerli olur. İşe yarar ve anlamlı bir veri elde edilmek isteniyorsa, cihaz ölçen herhangi bir aletin performansı çok iyi anlaşılmalıdır. BI, sterilizasyon döngüsünün dağıtılan letalitesini ölçmeye yardımcı olan bir alettir. BI üreticileri belirli bir partinin performansını tanımlamadan önce her bir BI partisinden yüzlerce birimi teste tabi tutar.

Tanımlanmış kültür koşulları altında BI büyüme yönünden negatif olduğu zaman yaşayan sporların mevcut olmadığı varsayılır ve çoğu durumda bu varsayım büyük olasılıkla doğrudur.

Ancak, numune bir aylığına, bir yıllığına ya da 10 yıllığına inkübe edilirse ne olur? Ağır yan hasara uğramış bir spor kendi yenileyemez ve büyüyemez mi? Bu, sterilizasyon döngüsünün yetersiz olduğu anlamına mı gelir? Tabi ki hayır, ancak bu, test sistemine sınırlar getirme gereğini ortaya koyar. Bir BI’yi 10 yıllığına inkübe etmek tabi ki makul değildir, ancak uygun sınırların ne olduğu nasıl bilinebilir?  Neyse ki, BI kullanıcıları için, BI’ler imalatçılarının test sınırlarını belirlemiş olduğu iyi tanımlanmış aletlerdir.

Kendi Kendine Yeten Biyolojik Göstergeler (SCBI)

Basit spor şeritlerinden daha karmaşık SCBI’lere kadar pek çok farklı BI konfigürasyonları mevcuttur. Spor şeritleri en az kontrol edilen BI sistemidir. İmalatçı BI’nin uygun kullanımı için talimatlar sunmaktadır, ancak kullanıcı istediği kültür ortamını ve inkübasyon süresini seçmekte serbesttir. Buna ek olarak, sonradan maruz kalmadan dolayı oluşan kirliliğin  olması ihtimali, gerekli aseptik kullanım sebebiyle SCBI’dekine göre şeritlerde daha fazladır.

SCBI’ler, hem sporları, hem de (belirli bir fazla büyüme için imalatçı tarafından geliştirilen) kültür ortamını içeren  kapalı bir sistemdir. Bunlar sıkı bir şekilde kontrol edilir, iyi tanımlanır ve dar olarak tanımlanmış bir performans sınırları vardır. Bu yüksek düzeyde kontrol öncelikle sporların sadece temin edilen kültür ortamında kullanılabilmesinden dolayı mümkün kılınmıştır. Bu, D-değeri, Z-değeri ve inkübasyon okuma zamanı gibi performans özelliklerinin yeniden üretilebilirliği bakımından kritik önem taşıyan bir faktördür.

Buna ek olarak, BI’de, tasarım ve imalatçı tarafından temin edilen kullanım talimatı sayesinde sporun yaşayıp yaşamadığının anlaşılması kolaydır. Negatif ve pozitif bir birimin özellikleri (genellikle renk değişimi) testin sonunda sporların yaşayıp yaşamadığına dair herhangi bir şüphe bırakmayacak kadar iyi tanımlanmıştır.

SCBI İnkübasyon Zamanı

SCBI’nin en ilgi çekici özelliklerinden biri daha az inkübasyon süresi (RIT) istemi için ideal bir test sistemi oluşudur. RIT istemi, kullanıcıların testin ne zaman tamamlanmış addedilebileceğini bildiren, test sistemi üzerine yerleştirilen bir sınırdır.

İmalatçı, yüzlerde BI birimi kullanarak kabul edilen ve tanınmış bir protokole göre test gerçekleştirdikten sonra okuma süresini belirler.  Hem imalatçı hem de son kullanıcı tarafından kontrol edilmesi gereken kritik önem taşıyan parametre inkübasyon sıcaklığıdır. Tüm diğer değişkenler SCBI’nin içkin özellikleri sayesinde kontrol edilir.

Zamanlama Herşeydir

SCBI’nin pozitif çıktığı hız doğrudan yaşayan sporların sayısına bağlıdır. Ne kadar çok yaşayan spor olursa, birim o kadar büyük olasılıkla pozitif çıkar. RIT’i belirlemede kullanılan mevcut protokol en son yaşanan spora odaklanır.

BI’lerin, kültürlendiğinde, büyüme yönünden pozitif ya da negatif olmak üzere sadece içi olası sonuca sahip oldukları düşünülür. Bu doğrudur, ancak BI’nin pozitif çıktığı hıza bakılarak bir sterilizasyon döngüsünün letalitesi hakkında çok şey öğrenilebilir.

Örneğin, yüz bin spora sahip bir Eztest buhar BI’si inkübasyonun yaklaşık üç-dört saati içinde büyüme belirtileri gösterecektir. Yaklaşık yüz yaşayan sporlu alt-letal döngüye tabi olan Eztest BI beş-sekiz saat içinde büyüme ile sonuçlanacaktır ve en son yaşayan spor 10 saat içinde büyüyecektir. Büyümesi 9-10 saat alan bir kaç yaşayan spor önemli bir letal hasarın meydana geldiğinin göstergesidir. Böyle bir hasar olumsuz koşullarda BI’deki organizmalarını kolayca tahrip edecektir. Bu tür bir durumun grafik örneği için Şekil 1’e bakınız.

Şekil 1. Canlı organizma ölüm eğrisiyle karşılaştırmalı olarak SCBI okuma sürelerinin bir örneği

Geçerli kılınmış bir sterilizasyon döngüsü genellikle BI’leri öldürmek için tasarlanmıştır, bu yüzden pozitif bir BI döngüde sorun olduğuna işaret eder. Ancak, bu her zaman canlı organizma yükünün hayatta kaldığı anlamına gelmez.  Daha açık ifade etmek gerekirse, canlı organizma yükü direnç özelliklerinin bilindiğini ve Şekil 1’dekine çok benzediğini varsayalım.  Grafiğe bakarak SCBI’nin 5-10 saat içinde pozitif sonuç vermediği takdirde, canlı organizma yükünü öldürmek için yeteri kadar letalitenin verildiğini görürüz.

SCBI steril malların kullanabileceği en değerli alet işlemcilerinden biridir ve özetle şunlara sahiptir:

•   İyi tanımlanmış sınırlar
•   Sabit uç noktalar
•   Kolay yorumlanabilen sonuçlar
•   Kısa okuma süreleri  

SCBI diğer BI sistemlerinden daha yüksek bir kontrol seviyesi sunar ve bu işte her şey kontrole bağlıdır

Lütfen “Spor Haberleri”nde ele alınmasını istediğiniz konular olması durumunda bizi e-posta ile haberdar ediniz.

 

 

02.12.2009